在分子生物学和生物医学研究中,电泳缓冲液的配制至关重要。以下是两种常用缓冲液的详细成分及制备方法。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
该缓冲液的终浓度配制1L所需成分如下:
- 2 mol/L Tris碱:242 g
- 1 mol/L 乙酸:571 ml
- 100 mmol/L EDTA:200 ml
- pH 8.0的0.5 mol/L EDTA补充至1L
2. 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
此缓冲液的成分及终浓度配制1L所需成分如下:
- 445 mmol/L Tris碱:54 g
- 445 mmol/L 硼酸盐:275 g
- 10 mmol/L EDTA:20 ml
- pH 8.0的0.5 mol/L EDTA补充至1L
3. 染料配制
在分子生物医学实验中,染料的使用极为重要。
- 1% 溴酚蓝:将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100 ml水中,充分搅拌或涡旋混合直至完全溶解。
- 1% 二甲/苯青FF:将1 g二甲/苯青FF溶解于适量水中,并定容至100 ml。
- 10 mg/ml 溴化乙锭:小心称取1 g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌至溶解后,用铝箔包裹,储存于4℃。
4. 凝胶上样液
根据实验需要,制备不同类型的凝胶上样液。
6×碱性凝胶上样液
配制10 ml液体所需成分如下:
- 0.3 N 氢氧化钠:120 µl
- 6 mmol/L EDTA:18 g
- 18% 聚蔗糖(400型):300 µl
- 0.15% 溴甲/酚绿和0.25% 二甲/苯青FF溶解后补充至10 ml。
6×甘油凝胶上样液
配制10 ml液体所需成分如下:
- 0.15% 溴酚蓝
- 0.15% 二甲/苯青FF
- 5 mmol/L EDTA
- 50% 甘油:15 ml
- 1% 溴酚蓝:15 ml
- 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):3 ml
在进行这些实验时,采用尊龙凯时的高品质实验材料和设备,可以进一步提升实验的准确性与可靠性。