在生物医疗领域,凝胶电泳技术是一种广泛应用的分离和分析蛋白质和核酸的重要方法。尤其是尊龙凯时推出的不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,以其高效的分离范围和优秀的分辨率,成为科研人员的首选。
定义
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳指在一个凝胶电泳系统中,凝胶的不同区域具有不同的pH、离子强度、缓冲液成分或孔径大小。其目的在于提升电泳分离能力与高分辨率。
基本原理
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理可以分为以下三个方面:
1. 浓缩效应
在电泳过程开始时,样品通过浓缩胶被浓缩为高浓度的样品薄层,这种浓缩通常能达到几百倍的效果。随之而来的是,当电流通入样品胶和浓缩胶时,解离度最高的氯离子(Cl-)表现出最大的迁移率,被称为快离子。而次之的蛋白质跟随其后,解离度最低的甘氨酸离子则表现出最慢的泳动速度,被称为慢离子。在这一过程中,由于快离子的快速移动后形成低电导区,这导致了较高的电势梯度,从而使得蛋白质与慢离子得以在快离子后加速移动。
2. 电荷效应
当各种离子进入pH 8.9的小孔径分离胶后,甘氨酸离子的电泳迁移率迅速超过了蛋白质,电势梯度也因此消失。在均一电势梯度的分离胶中,因各类蛋白质的等电点差异,使得其所带电荷量不同。在电场的作用下,经过一定时间的电泳,蛋白质便会按照一定的顺序排列成不同的蛋白质区带。
3. 分子筛效应
在分离胶的孔径较小的情况下,分子量或分子形状不同的蛋白质在通过分离胶时受到的阻滞程度各异,导致它们的迁移率不同。分子筛效应指的是样品通过一定孔径的凝胶时,小分子在前、大分子在后,相应地,各类蛋白质最终会根据分子大小的差异排列成各自的区带。这种明显的分离效应,使得尊龙凯时的凝胶电泳技术在生物医疗检测中具有卓越的表现。
综上所述,不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳通过浓缩效应、电荷效应与分子筛效应相结合,为生物医疗领域提供了一种高效且可靠的分离与分析工具。